20×EvaGreen荧光染料 EvaGreen 是一种用于实时定量PCR(qPCR)的DNA结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于SYBR Green I。除了有相似的光谱特性, EvaGreen有三个主要特点使它区别于SYBR Green I。 1.EvaGreen对PCR的抑制性远小于SYBR Green I,因此,使用EvaGreen进行的qPCR实验可以使用快速PCR步骤。 2.EvaGreen在实验中可以使用较高的浓度,从而获得远强于SYBR Green I扩增信号;较高浓度的EvaGreen也*了“染料重分布”的缺陷,使EvaGreen既可用于多重PCR,也可用于高分辨率(高清晰)熔解曲线分析( HRM );该分析正被越来越多的用于PCR后的基因分型和异源双链分析。由于SYBR Green I 对PCR的抑制性,从而要求其使用浓度必须很低,因此SYBR Green I无法解决由低浓度造成的染料重分布问题,既不能用于多重PCR也不能用于HRM。同时,染料重分布问题也可能影响常规熔解曲线的可靠性,因为低熔点的DNA链可能由于这种原因而无法检测到。 3.EvaGreen 的稳定性较好。在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以*的储存在室温或冰箱里,也可以反复冻融。与之相反,SYBR Green I不稳定而且降解后对PCR抑制性更强。 编号 规格 售价¥ 说明书下载 RF024 100ul 200.00 EvaGreen荧光染料 相关产品: 20ⅹSybr Green I荧光染料 120.00/100ul 20ⅹRiboGreen荧光染料 600.00/100ul 50ⅹROX荧光染料 200.00/100ul 10000×EvaGreen核酸染料 150.00/ml 10000×SYBR Green II RNA核酸染料 800.00/100ul 产品特性: l 较高的灵敏度 在推荐浓度下使用时可以获得较强的 PCR 扩增信号。 l PCR抑制性较小 智能化的“按要求释放” DNA 结合技术使得 EvaGreen 对 PCR 的抑制远小于 SYBR Green I 。 l 和快速 PCR 兼容 对 PCR 干扰较小,从而较大的缩短了 PCR 延伸时间。 l 非常适合 HRM 分析 无“染料重分布”缺陷,兼容 PCR 后的高分辨率熔解曲线( HRM )分析。 l 兼容多重 PCR 在推荐浓度下使用时,无扩增子之间的染料迁移现象。 l **强稳定性 在大部分生化条件下非常稳定,可在室温下储存并可反复冻融。 l *性好 细胞膜穿透性测试表明,EvaGreen几乎不能穿透细胞膜,*性高 l 优越的兼容性 和 SYBR GREEN I 光谱相似,和各**品牌的 qPCR 仪器兼容。 用 EvaGreen 替代 SYBR Green 1 ,毋须改变任何您目前使用的操作步骤和仪器设备。 使用方法: Reagent Quantity, for 50 μl of reaction mixture Final concentration 10X Taqbuffer(without MgCl2) 10ul 1X 25mM MgCl2 4-5ul 2.0-2.5mM 10mM dNTP 1ul 0.2mM 20ⅹEvaGreen 1.25-2.5ul 0.5X-1X PrimerI(25pmol/ul) 1ul 0.5pmol/ul PrimerI(25pmol/ul) 1ul 0.5pmol/ul Taq(5U/ul) 0.4ul 2U/50ul Template DNA variable 50 pg -1 μg ddH2O Up to 50ul 参考文献: 1. Mao, et al. Characterization of EvaGreen Dye and the implication of its physicochemical properties for qPCR applications. BMC Biotechnology 7, 76 (2007). 2. The Royal Society of Chemistry (2014), doi: 10.1039/c3an02334f